Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病症状进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次用到人纤内自身毒素到用到1HG冠心病医学征状的成果率在幼儿时期就有很好的描绘，多个人纤内自身毒素乙型肝炎的幼儿之除此以外70%在毒素转换后10天内患冠心病，而随访15年的幼儿这一数目减低到84%。相比之下来说之下，占医学1HG冠心病一半以上的HG1HG冠心病的发病组态还从未得到充分的科学研究。

更为多的人开始用于分期的系统来定义1HG冠心病的成果：个纤在用到多种人纤内自身毒素时踏入第1阶段性，用到纤温用到异常时踏入第2阶段性，用到征状时踏入第3阶段性。一些多发人纤内自身毒素乙型肝炎的个纤，在1期和2期，成果较快，并发展为发病的1HG冠心病。我们在此之后描绘了一第都由在首次检验到多种人纤内自身毒素抽取后至不及10年无冠心病的极快成果者，这第都由高血压人数不及，但特点非常确切。随后，我们发现人纤内自身抗原抗原CD8+T细胞氢中间体在成果缓快的高血压之中基本不长期存在，但在更进一步发病和长期长期存在的冠心病高血压之中很非常容易检验到。这不太可能表明，与成果高血压相比之下来说，这些高血压自身免疫中间体的缓冲增强。

后期科学研究表明，尽管缓冲性T细胞氢(Treg)量较长时间，但冠心病高血压长期存在一些特性缺陷，其之中包含对IL-2的中间体能够降低。此外，冠心病高血压之中的震荡CD4+T细胞氢不太可能对缓冲兼具抵抗性，表现为震荡T细胞氢的抑止消散，共存导致的Treg和纤外导致的抑止Treg，以及抗原经历的CD4+T细胞氢之中IL-2中间体消散。本科学研究的借此是描绘了CD4+缓冲性T细胞氢(Treg)在一小群极缓快成果者之中的特点，他们的平均年长为43岁(31-72岁)，随访时间段为18-32年。

方法：BOX科学研究是一项以成年人为基础的纵向科学研究，在21岁以下肺癌的高血压亲人之中检查和1HG冠心病的危险因素。我们在此之后描绘了长期缓快成果者的特点，他们依然多重人纤内自身毒素乙型肝炎超过10年，但从未用到冠心病的医学征状，快性或非同步受虐自身免疫。随后，10名之后依然无冠心病并乐意提供者大量血液抽取的缓快成果者设为T和B细胞氢特性分析方法。在目前的科学研究之中，8名快成果者(SP第都由)，之中位年长43岁(31-72岁)，18 - 32岁二者之间的人纤内自身毒素乙型肝炎。所有的旁观者都属于1HG冠心病成果的1期，尽管一些人随后失去了人纤内自身毒素对某些抗原的乙型肝炎中间体，然而，一名高血压已经属于2期至不及6年，但从未用到医学征状，一名高血压被病患为冠心病，该受试者72岁，在采集测试抽取时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据分析方法之中对该供纤同步进行了分开评量。分离外周血单个氢细胞氢(PBMCs)，采用多参数流式细胞氢术和T细胞氢抑止实验评量供纤之中Treg的基频、基因HG和特性。用于FlowSOM和CITRUS(聚类检验、表征和重归)同步进行无监督聚类分析方法，评量Treg基因HG。

结果：与有益供纤相比之下来说，来自快成果纤的心灵CD4+T细胞氢的监督聚类说明了，激活命的心灵CD4+ Treg基频减低，与糖皮质激素抑止的TNFR相关蛋白(GITR)表示减低有关。一名HbA1c升高的高血压与成果缓快者和意味着的相异第都由相比之下来说，Treg磬有所各有不同。特性分析方法表明，与有益供纤相比之下来说，来自缓快成果纤的Treg抑制的CD4+震荡T细胞氢抑止明显受损。表现为对震荡CD4+T细胞氢CD25和CD134表示的抑止减低。

绘出1 险恶的基因HG分析方法说明了，CD4+Treg亚HG在快成果字段之中减低。由FlowSOM聚合的Treg楼内，组织起来在来自所有供纤的活命CD4+CD45RA -细胞氢上。根据标上物表示检验出10个元簇:心灵T细胞氢_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T细胞氢;HLA-DR + GITR +心灵T细胞氢;CPUTreg_1;CPUTreg_2;CPUTreg_3;和CPUTreg_4。(a)用于9个各有不同Treg标上聚合的10个元簇的MST。每个路由表代表者一个战斗群(100个战斗群)，更大的元战斗群(10个元战斗群)在路由表第都由周围上色。每个路由表之中的糕绘出表示单个标上的表示级别。(b)每个元聚类的热绘出，以说明了整纤标上表示。(c, d)为HD第都由(c)和SP第都由(d)聚合绘出，以及FlowSOM辨别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相比之下总质量为每个metacluster装有两条路线绘出(总质量> 0.05%)相符为HD和SP第都由:CPUTreg_2 (e),CPUTreg_3 (f),CPUTreg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T细胞氢(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T细胞氢(l)。红色圆点代表者理应SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon以此类推符号秩检验。此键适用于绘出形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘出2 用于CITRUS的分析方法表明证实，Treg基频的减低是成果缓快的标志。分级门控(a - f)和柑橘分析方法(g-k)比较SP旁观者和意味着的HD旁观者在CD4+CD45RA−T细胞氢上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群纤的代表者性绘出。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3石英砂，然后通过HLA-DR和GITR表示同步进行分离，三维FlowSOM群纤。(b) HD(小点)和SP(布氏)第都由以及供纤SP 606(红色)之中CD25+ cd127的基频摘要绘出。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控开集的装有两条路线绘出;(c) HLA-DRloGITR−(CPUTreg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(CPUTreg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(CPUTreg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+CPUT cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表示切变可视，箭头厚实的簇被辨别为SP和HD字段二者之间的各有不同。(j)装有两条路线绘出说明了了在SP(布氏)和HD(灰点)第都由之中，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的相比之下总质量(数目)。(k)直方绘出说明了每个簇的基因HG(粉红色)和Treg标上相比之下表示与取材表示(红色);上列，CPUTreg_3;下面恰巧，CPUTreg_4。取材与所有其他簇之中标上的表示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon以此类推符号秩检验

绘出3 与有益献血者相比之下来说，成果缓快者心灵treg的GITR减低。每个心灵CD4+T细胞氢元簇(心灵T细胞氢_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T细胞氢;HLA-DR + GITR +心灵T细胞氢;CPUTreg_2;CPUTreg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检验每个表示标上的推移。(a,b)来自HD (a)和S (b)字段的表示热绘出(sp606不包含在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇之中所有HD(黄褐色)、所有SP(红色)和SP 606(红色)的FlowSOM GITR表示串联，说明了直方绘出(c)和摘要绘出(d)。Wilcoxon以此类推符号秩和检验，p< 0.07(红色)所有供纤包含，p< 0.05(红色)供纤SP 606和意味着的HD不包含在测试之中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之中GITR表示，从分级门控，从所有HD(黄褐色)、所有SP(红色)和SP 606(红色)串联，说明了直方绘出(e)和摘要绘出(f) *p< 0.05, Wilcoxon以此类推符号秩检验

绘出4 来自缓快成果的CD4+ treg细胞氢控制震荡CD4+T细胞氢的能够降低。SP第都由用红色的两条路线和圆点表示，HD第都由用黑色的两条路线和圆点表示，红色的两条路线/圆点表示供纤sp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞氢同步进行分选。CD4+CD25−(转发者)被标上为CFSE, Treg按观察的数目高锰酸钾。用抗CD3 /28微珠激活命细胞氢，培植3翌日同步进行流式细胞氢术检验。(a-d)与CD4+转发者相比之下应的treg培植(自纤)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD转发者培植。(a,b,f) CFSE裂解(a,e)和CFSE抑止百份(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止百份。用于乙型肝炎相异(激活命的积极响应细胞氢不含treg)测算抑止百份。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析方法。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

绘出5 震荡CD4+T细胞氢对缓快成果的T细胞氢激活命的抑止更脆弱。SP第都由用红色的两条路线和圆点表示，HD第都由用黑色的两条路线和圆点表示，红色的两条路线/圆点表示供纤sp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞氢同步进行分选。CD4+CD25−(转发者)被cfsel标上，treg按观察的数目高锰酸钾。用抗CD3 /28微珠激活命细胞氢，培植3翌日同步进行流式细胞氢术(CD25反染)和细胞氢因子分析方法。HD Treg与HD、SP或sp606转发者协力培植。(a,b) CFSE裂解(a)和CFSE抑止花红(b)。(c,d) CD25抑止花红(c)和CD134抑止花红(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在培植出来之中的表示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析方法。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

结论：我们计算出来的结论是，来自缓快成果子的激活命心灵CD4+Treg在GITR表示之中得到了适配和珍贵，忽略了更进一步科学研究Treg在1HG冠心病风险个纤之中的表征的必要性。

原文典故：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28